Pemeriksaan TPC (Total Plate Count) adalah metode yang digunakan untuk menghitung jumlah total mikroorganisme dalam suatu sampel, baik itu makanan, minuman, air, atau produk lainnya.
Tujuan Pemeriksaan TPC
- Menentukan kualitas mikrobiologi suatu produk – Apakah produk tersebut aman untuk dikonsumsi atau digunakan.
- Mendeteksi potensi kontaminasi – Mengetahui apakah ada bakteri atau mikroorganisme yang dapat menyebabkan kerusakan atau penyakit.
- Memantau kebersihan dan efektivitas proses produksi – Menilai apakah prosedur sanitasi dan kebersihan telah dilakukan dengan baik.
- Menilai masa simpan produk – Jumlah mikroorganisme yang tinggi bisa menandakan bahwa produk akan cepat rusak.
Proses Pemeriksaan TPC
- Pengambilan Sampel
- Sampel diambil dari produk, air, atau lingkungan tertentu menggunakan teknik aseptik.
- Pengenceran Sampel
- Sampel diencerkan dalam larutan buffer steril untuk mendapatkan jumlah mikroba yang sesuai untuk dihitung.
- Penanaman pada Media Nutrien Agar
- Sampel diencerkan kemudian ditanam dalam media agar khusus (misalnya Plate Count Agar) menggunakan metode pour plate atau spread plate.
- Inkubasi
- Cawan petri yang berisi media dan sampel disimpan dalam inkubator pada suhu yang sesuai (biasanya 35–37°C selama 24–48 jam).
- Perhitungan Koloni
- Setelah inkubasi, koloni bakteri yang tumbuh dihitung dan hasilnya dinyatakan dalam CFU/mL atau CFU/g (Colony Forming Unit per mililiter atau gram).
Interpretasi Hasil TPC
- Jika jumlah mikroorganisme terlalu tinggi, produk bisa dianggap tidak aman atau tidak memenuhi standar.
- Standar jumlah TPC yang diperbolehkan bervariasi tergantung pada jenis produk dan regulasi yang berlaku (misalnya, standar dari BPOM, SNI, atau Codex Alimentarius).
Faktor yang Mempengaruhi Hasil TPC
- Kualitas bahan baku – Bahan baku yang terkontaminasi dapat menyebabkan nilai TPC tinggi.
- Kondisi penyimpanan – Suhu dan kelembaban mempengaruhi pertumbuhan mikroba.
- Kebersihan lingkungan produksi – Proses produksi yang tidak higienis dapat meningkatkan jumlah mikroorganisme.
- Metode pengolahan dan pengemasan – Proses seperti pasteurisasi atau sterilisasi dapat mengurangi jumlah mikroorganisme.
Pemeriksaan TPC sangat penting dalam industri makanan, farmasi, dan kesehatan untuk memastikan keamanan dan kualitas produk sebelum dikonsumsi atau digunakan oleh masyarakat.
Jumlah Ulangan dalam Pemeriksaan TPC
Dalam pemeriksaan Total Plate Count (TPC), jumlah ulangan atau replikasi sangat penting untuk memastikan keakuratan dan keandalan hasil. Biasanya, jumlah ulangan yang digunakan mengacu pada standar laboratorium atau regulasi seperti Standar Nasional Indonesia (SNI), Badan Pengawas Obat dan Makanan (BPOM), Codex Alimentarius, atau metode ISO 4833-1:2013.
Minimal 2–3 ulangan per sampel
- Biasanya dilakukan duplo (2 ulangan) atau triplo (3 ulangan) untuk mengurangi kesalahan dan memastikan konsistensi hasil.
- Jika terdapat perbedaan hasil yang signifikan antar ulangan, bisa dilakukan pengujian tambahan.
Pengenceran Bertingkat (Serial Dilution)
- Sampel umumnya dibuat dalam pengenceran seri (misalnya 10⁻¹, 10⁻², 10⁻³, dst.) untuk mendapatkan hitungan koloni yang optimal (antara 25–250 CFU per cawan).
- Setiap tingkat pengenceran biasanya diuji dalam dua atau tiga cawan petri untuk meningkatkan akurasi.
Standar yang Digunakan
- ISO 4833-1:2013 merekomendasikan minimal dua ulangan per pengenceran.
- AOAC (Association of Official Analytical Chemists) dan SNI 2897:2008 juga menyarankan duplo atau triplo untuk memastikan keandalan hasil.
- BPOM atau laboratorium tertentu bisa memiliki kebijakan khusus tergantung pada jenis sampel dan tujuan analisis.
Untuk pemeriksaan TPC, umumnya dilakukan minimal 2 ulangan per sampel (duplo), namun lebih baik menggunakan 3 ulangan (triplo) untuk meningkatkan akurasi, terutama jika data akan digunakan untuk pengambilan keputusan penting seperti pengujian keamanan pangan.
